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小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒檢測原理

點擊次數:48     更新時間:2025-06-30

小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒檢測原理

產品名稱:小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒

規格:96T

儲存條件:2-8℃

有效期:6個月

用途:用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中小鼠γ干擾素(IFN-γ)的含量。

檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠γ干擾素(IFN-γ)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠γ干擾素(IFN-γ)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

試劑盒性能:

1. 檢測范圍:25 pg/mL – 800 pg/mL。

2. 靈敏度:最-低檢測濃度小于 1.0 pg/mL。

3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4.  重復性:板內變異系數小于10% ,板間變異系數小于15%

樣品收集、處理及保存方法:

以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。

1.  血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

2.  血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

3.  細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

4.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

注:標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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