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凝血酶的正確使用方法您知道多少

點擊次數:6811     更新時間:2019-03-20

凝血酶的正確使用方法您知道多少

信帆生物供應的凝血酶為牛血或豬血中提取的凝血酶原,經激活而得的無菌凍干制品。溶于水,10mg/ml。也可溶于0.1%BSA配成的100u/ml儲存液,-20℃保存。規格為:1700U/瓶  

凝血酶凍干粉

Thrombin from bovine plasma

 

拼音名】Ningxuemei Dongganfen

英文名】Thrombin from bovine plasma

別名】凝血酵素;Factor IIa

類別】僅供凝血試劑、科研用途

溶解性】溶于水,10mg/ml。也可溶于0.1%BSA配成的100u/ml儲存液,-20℃保存。
規格】小包裝:1700U/瓶  

貯藏】密封,-20°C以下貯存。

性   狀】本品為白色、類白色或淺黃色凍干塊狀物或粉末。每1ml中含500單位的0.9%氯化鈉溶液可微顯渾濁

產品介紹

本品是從豬血或者牛血清中提取凝血酶原,經激活、純化、超濾、凍干而得的無菌凍干品。

檢  查干燥失重取本品,精密稱定,置五氧化二磷干燥器中減壓干燥4小時,減失重量不得過3.0%

無菌檢測】 取本品,分別加0.9%無菌氯化鈉溶液5ml溶解后,依法檢查,應符合規定。

 

效價測定:

纖維蛋白原溶液的制備

取纖維蛋白原約30mg,精密稱定,用0.9%氯化鈉溶液1.5ml溶解,加凝血酶溶液0.1ml(約3單位),快速搖勻,室溫放置約1小時至*凝固,取出凝固物,用水洗至洗出液加硝酸銀試液不產生渾濁,在105°C干燥3小時,稱取重量,計算纖維蛋白原中含凝固物的含量(%)。然后用0.9%氯化鈉溶液制成含0.2%凝固物的纖維蛋白原溶液,用0.05mol/L磷酸氫二鈉溶液或0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液調節PH值至7.0~7.4,再用0.9%氯化鈉溶液稀釋成含0.1%凝固物的溶液,備用。

標準曲線的制備

取凝血酶標準品,用0.9%氯化鈉溶液分別制成每1ml中含5.0單位、6.4單位、8.0單位、10.0單位的標準品溶液。另取內徑1cm、長10cm的試管4支,各精密加入纖維蛋白原溶液0.9ml,置37°c±0.5°c水浴中保溫5分鐘,再分別精密量取上述4種濃度的標準品溶液各0.1ml,迅速加入上述各試管中,搖勻,立即計時,置37°c±0.5°c水浴中,觀察纖維蛋白的初凝時間,每種濃度測五次,求平均值(5次測定中大值與小值的差不得超過平均值的10%,否則重測)。標準品溶液的濃度應控制凝結時間在14~60秒為宜。在雙對數坐 標線紙上,以標準品效價(單位)為橫坐標,凝結時間(秒)為縱坐標,計算回歸方程。

測定法

  取本品3瓶,分別精密稱定其內容物的重量,每瓶按標準量分別加0.9%氯化鈉溶液制成與標準曲線濃度相當的溶液,精密吸取0.1ml,按標準曲線的制備方法平行測定5次,求出凝結時間的平均值(誤差要求同標準曲線),用回歸方程求得效價(單位),按下式計算:凝血酶效價(單位/毫克)=Ux10xV/W ,凝血酶效價(單位/瓶)=Ux10xv 式中 U為0.1ml供試品在標準曲線上讀得的實際效價(單位); V為每瓶供試品溶解后的體積,ml; W為每瓶供試品的重量,mg。 并計算出每瓶相當于標示量的百分數。

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