放射免疫方法檢測(cè)透明質(zhì)酸A的含量-信帆生物

透明質(zhì)酸A在大多數(shù)情況下都是選擇用放射免疫的方法來(lái)檢測(cè)，包括上也經(jīng)常選擇使用放免的方法來(lái)測(cè)透明質(zhì)酸A，那么放免的原理具體是什么，檢測(cè)靈敏度是多少？上海信帆為您答疑解惑？

透明質(zhì)酸（Hyaluronic Acid, HA）是一種廣泛存在于細(xì)胞外基質(zhì)中的高分子多糖，主要由肝內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行降解。肝組織正常結(jié)構(gòu)受到損傷時(shí)，一方面 HA 的合成增加，另一方面肝臟對(duì) HA 的降解能力下降，導(dǎo)致血清中 HA 水平明顯增高，并且增高的程度與肝組織炎癥及纖維化程度呈正相關(guān)。

急性肝炎、慢性活動(dòng)性肝炎、肝硬化以及肝癌都導(dǎo)致血清 HA 水平增高，某些惡性腫瘤、肺心病患者的血清 HA 水平也會(huì)增高。慢性肝炎在用干擾素或激素進(jìn)行治療時(shí)，伴有血清 HA 水平下調(diào)。胚胎兒血清 HA *，新生兒血清 HA 仍維持在較高水平，隨著年齡增長(zhǎng)血清 HA 逐漸降低，到中、老年又略有升高。

血清 HA 水平是反映肝纖維化的重要指標(biāo)，也可用于抗纖維化藥物治療時(shí)的動(dòng)態(tài)觀察。

本方法采用競(jìng)爭(zhēng)放射免疫分析法，即標(biāo)準(zhǔn)或待測(cè)樣品中的 HA 和¹²⁵I-HA 共同與*的透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白（Hyaluronic Acid BindingProtein, HABP）在適宜的條件下進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)。一部分 ¹²⁵I-HA125與 HABP 結(jié)合形成復(fù)合物，而另一部分呈游離狀態(tài)。 I-HA 與 HABP

結(jié)合的比例取決于標(biāo)準(zhǔn)或待測(cè)樣品中非標(biāo)記 HA 的含量，非標(biāo)記 HA的含量越高，¹²⁵I-HA 與 HABP 形成的復(fù)合物越少。HA-HABP 復(fù)合物與 HABP 抗體和第二抗體形成交聯(lián)的聚合物沉淀下來(lái)，測(cè)定沉淀物的放射性計(jì)數(shù)。經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)臄?shù)據(jù)處理后可獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線，從標(biāo)準(zhǔn)曲線

上查出被測(cè)樣品的 HA 含量（數(shù)據(jù)可由計(jì)算機(jī)自動(dòng)處理）。

【適用儀器】

適用于各類(lèi)γ-放射免疫分析儀。

【血樣處理】

取靜脈血分離血清，48 小時(shí)內(nèi)測(cè)量可在 2~8℃密閉保存；超過(guò) 48

小時(shí)-20℃密閉冷凍保存，至少穩(wěn)定 2 個(gè)月，但要避免反復(fù)凍融。

【本藥盒的主要技術(shù)指標(biāo) 】

1. 測(cè)定范圍：25~800ng/ml；

2. 靈敏度：5.5ng/ml；

3. 精密度：批內(nèi)變異 CV<10%；批間變異 CV<15%。

【注意事項(xiàng)】收到藥盒后盡快存放在 2-8℃保存，使用前應(yīng)平衡至室

溫，加試劑前必須搖勻。

1. 操作前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)，不同批號(hào)的試劑不得混用。

2. 加樣操作應(yīng)快速準(zhǔn)確手法一致，盡量縮短整個(gè)加樣時(shí)間。一

批測(cè)定中管數(shù)不宜過(guò)多，以加入 HABP 前后管相差在 5 分鐘

內(nèi)為宜，嚴(yán)格控制每步反應(yīng)的時(shí)間和溫度。

3. 加樣頭不可混用，以免交叉污染。

4. 加標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控或樣品時(shí)注意將樣本加到試管底部；加標(biāo)記

物時(shí)加樣頭不要碰到液面；加抗體時(shí)加樣頭應(yīng)在液面之上約

1cm 以免交叉污染。

5. 溫浴之前應(yīng)充分混合均勻

放射免疫方法檢測(cè)透明質(zhì)酸A的含量-信帆生物