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小鼠細胞表面粘蛋白(Emcn)檢測原理!

點擊次數:1615     更新時間:2021-09-28

小鼠細胞表面粘蛋白(Emcn)檢測原理!

檢測原理:

采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠細胞表面粘蛋白(Emcn)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠細胞表面粘蛋白(Emcn)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

產品名稱:小鼠細胞表面粘蛋白(Emcn)ELISA檢測試劑盒

規格:96T

儲存:2-8℃,避光防潮保存

有效期:6個月

實驗步驟(僅供參考):

1.  從室溫平衡60min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;

4.  隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

 7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

注意事項:

1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡60分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶*溶解后再使用。樣本在使用前也要在室溫平衡60分鐘。

2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

3.  預處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。

4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

本產品僅供科研實驗用,不做其它用途!

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