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超敏C反應蛋白(人,大鼠,小鼠)ELISA試劑盒選擇和檢測

點擊次數:1442     更新時間:2015-08-25

    1930年TILLETHE和FRANCIS在肺炎患者血清中發現了一種反應素,它能沉淀肺炎球菌的C多糖,被稱為C反應蛋白。CRP是炎癥標志物,在發熱性疾病、各種炎癥狀態和創傷時,血清CRP水平會明顯增高。以來,常以健康群體CRP的95%參考值上限判斷患者有無明顯的感染性炎癥。但是,高靈敏度CRP(Hs-CRP)檢測方法的開發和應用研究結果表明,原先認為是正常的血清CRP水平(例如<3mg/L)的高低卻同未來的病的發生密切相關。大量研究資料表明,動脈粥樣化的血栓形成除了是脂肪堆積過程外,也是一個慢性炎癥過程,而CRP是動脈粥樣化的血栓形成疾病的介導和標志物。CRP對心絞痛、急性冠狀動脈綜合癥和行經皮血管成形術患者,具有預測心肌缺血復發危險和死亡危險的作用。

1、C反應蛋白的生物學特性及其與動脈粥樣硬化
CRP是一種Υ球蛋白,分子量為105KD,主要的生物學特性有:(1)通過經典途徑激活補體,消耗補體,釋放炎癥介質,促進粘附和吞噬細胞反應,使細胞溶解;(2)作用于淋巴細胞和單核細胞的受體,導致淋巴細胞活化、增生,促進淋巴因子生長,并促進抑制性T淋巴細胞增生,也增強了吞噬細胞的吞噬作用;(3)抑制血小板的聚集和釋放反應,還能妨礙血小板引起血塊收縮。在炎癥、感染、組織損傷時,由于細胞因子(如白細胞介素-6、腫瘤壞死因子)等的刺激,CRP主要由肝臟生成,其血中半衰期穩定在19小時,其濃度依賴于肝臟的生成量。CRP水平是判斷組織損傷的敏感指標,在損傷的6-8h內,血清CRP量迅速升高,并在48~72小時達高峰。
zui近研究顯示,在動脈硬化病變進展過程中,CRP可能是反映疾病演進的一個標志。動脈粥樣硬化(AS)的發病和進展中有許多炎性細胞的參與。炎癥反應標志物CRP能激活補體,引發脂質沉積,此為AS的始動因素之一。CRP可與脂蛋白結合,由經典途徑激活補體系統,造成血管內膜受損。內皮損傷導致的炎性物質釋放促進了內皮細胞與循環血白細胞的相互作用,而與AS的發生發展有關。國外學者在對CHD患者尸檢發現,動脈粥樣斑塊組織中有大量的炎癥細胞如單核細胞、巨噬細胞和T淋巴細胞聚集,急性冠狀動脈綜合征斑塊破裂的部位炎性反應zui為明顯,CRP沉積較多。這說明AS不僅僅是脂質沉積病,炎癥反應在其發展和粥樣斑塊的不穩定化過程中起了主要作用,CRP被視為粥樣病灶不穩定的標志之一。活動性炎癥可通過硬化灶纖維性被膜組織的不穩定化,引起斑塊破裂,而發生冠狀動脈閉塞,CRP濃度升高與事件發生率增加相關。研究人員在檢測了CRP在冠狀動脈內皮細胞粘附分子表達方面的作用后提出,CRP可能在AS的炎癥反應過程中起了促進作用,其濃度與冠狀動脈粥樣硬化的嚴重程度呈正相關。更有相關報告指出,因各種原因增高的CRP可直接促進粥樣血栓的形成。

2、C反應蛋白的檢測方法及影響因素
CRP的檢測方法有單向免疫擴散法、膠乳凝集法、酶聯吸附法、速率散射比濁法等,其原理都是利用特異抗CRP抗體與檢樣中CRP反應,根據形成的沉淀環直徑、沉淀峰高度、凝集程度或呈色程度,判定檢樣中CRP含量,定量標準多認為應<10mg/L。血清CRP主要受炎癥影響,其在血液中濃度一般相對穩定,不受放療、化療、皮質激素治療影響。用CRP診斷感染時,應注意其局限性:(1)CRP為一種非特異蛋白,有很多因素如損傷出血也可使其升高;(2)CRP由肝臟產生,當肝嚴重損害時其增高可不明顯;(3)可有假陽性;(4)病毒感染時CRP可不升高。目前,由于WHO的標準的建立,血中CRP測定已成為一種高精度、高靈敏度、易實行的檢測方法。近年發現,檢測血清CRP水平對心絞痛的發病及預后判斷是一種既靈敏又具高特異性的實驗室檢測指標。

3、血清C反應蛋白的測定在冠心病研究中的意義
CRP與冠心病的發生及預后判斷 研究發現,血清CRP水平與冠心病的發生、發展及預后有直接。高水平的CRP使心肌梗塞的危險性增加3倍;CRP水平zui高的婦女與CRP水平zui低的相比,發生疾病的危險性增加5倍,發生心肌梗塞的危險性增加7倍。CRP濃度的上升與血肌、肌鈣蛋白I的濃度升高同樣,可使急性心肌梗塞(AMI)后患者或不穩定性心絞痛(UA)患者發生意外的短期危險性增加。上述較易測定之指標可成為冠狀動脈疾病患者的意外危險性預測因子,特別是血CRP濃度可成為制定疾病預后的指標。已知發生心肌壞死時血中CRP升高,這一現象提示對已有冠狀動脈疾病的患者,其發生意外的危險性,在分析CRP濃度Cutoff值的基礎上,已成為判斷有無心肌梗塞(AM)的非常重要的因素。但CRP增高是疾病危險性增高的強有力的決定因素,將其作為判斷預后乃至治療效果的指標是十分有用的。CRP是急性冠脈綜合征(CAD)的重要危險因子,其水平對CAD患者的生存有獨立預測價值。CRP水平上升與UA患者住院期內及1~2年后新的急性冠脈事件發生的危險性增加有關。炎癥反應可能引起局部血管內皮的激活,粥樣斑塊產生裂隙,而導致UA和MI的發生。研究人員在對UA患者CRP水平入院時、48小時和出院時測定后認為,在UA患者中,CRP是判斷90天危險增加的獨立的強預報因子,尤其是出院時較高的CRP水平(≥8.7mg/L),可能預示著病變的不穩定性和復發性。CRP可能成為疾病危險性評價中極有價值的因素。

4、局限性
但醫生在應用超敏C反應蛋白于疾病的診斷及預后判斷等方面的過程中,必須了解血漿CRP濃度個體間變化,(有文章認為個體間血漿CRP濃度變化至少為118%)必須牢記感染過程、炎癥性疾病也會引起血漿CRP升高,除疾病外,CRP還可應用于肺部感染,慢性阻塞性肺疾病急性加重期、急性胰腺炎、肝硬化和重癥肝炎、感染性腎積水、腎膿腫、腹腔腫瘤伴感染者以及新生兒敗血癥的診斷等方面,其診斷炎癥性疾病的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值均優于傳統的感染指標如紅細胞沉降率、白細胞及嗜中性粒細胞計數、ASO等,其水平高低與疾病預后有一定的相關性。

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